Javascript hazırda brauzerinizdə deaktivdir. Javascript deaktiv edildikdə bu veb saytın bəzi xüsusiyyətləri işləməyəcək.
Xüsusi məlumatlarınız və maraqlandığınız dərmanla qeydiyyatdan keçin və biz təqdim etdiyiniz məlumatları geniş məlumat bazamızdakı məqalələrlə uyğunlaşdıracağıq və dərhal PDF nüsxəsini sizə e-poçtla göndərəcəyik.
Ban-Lan-Gen qranulları bağırsaq mikrobiotasını modulyasiya etməklə və bağırsaq SCFA-dan əldə edilən GLP-1 istehsalını bərpa etməklə siçanlarda dekstran natrium sulfatın yaratdığı xroniki residiv verən koliti zəiflədir.
Jiao Peng,1-3,*Li Xi,4,*Zheng Lin,3,5 Duan Lifanq,1 Gao Zhengxian,2,5 Diehu,1 Li Jie,6 Li Xiaofeng,6 Shen Xiangchun,5 Xiao Haitao21Pekin Universiteti Şençjen Xəstəxanasının Əczaçılıq şöbəsi, Şençjen, Çin Xalq Respublikası; 2Şençjen Universiteti Səhiyyə Elmləri Mərkəzi Əczaçılıq Məktəbi, Şençjen, Çin Xalq Respublikası; 3Quizhou Tibb Universiteti Etnik Təbabət və Ənənəvi Çin Təbabətinin İnkişafı və Tətbiqi Mühəndislik Texnologiyaları Tədqiqat Mərkəzi Təhsil Nazirliyi, Quizhou Əyalət Əczaçılıq Açar Laboratoriyası, Quizhou Tibb Universiteti, Quizhou, Çin Xalq Respublikası; 4Qastroenterologiya şöbəsi, Pekin Universiteti Şençjen Xəstəxanası, Şençjen, Çin Xalq Respublikası; 5Quizhou Tibb Universitetinin Əczaçılıq Məktəbi, Dərman Bitkilərinin Funksiyası və Tətbiqi Dövlət Açar Laboratoriyası, Quizhou; 6 Laboratoriya Təbabəti Bölümü, Pekin Universiteti Şençjen Xəstəxanası, Şençjen, Çin [email protected] Şen Xiangchun, Əczaçılıq Məktəbi, Quyçjou Tibb Universiteti, Quyçjou, Çin Xalq Respublikası, 550004, E-poçt [email protected] Məqsəd: GLP-1 əsaslı terapiya iltihabi bağırsaq xəstəliyi üçün yeni bir müalicə variantıdır. Ban-Lan-Gen (BLG) qranulları müxtəlif iltihabi vəziyyətlərin müalicəsində potensial iltihab əleyhinə aktivlik nümayiş etdirən məlum antiviral TCM formulasiyasıdır. Lakin, onun kolitə qarşı iltihab əleyhinə təsiri və təsir mexanizmi hələ də aydın deyil. METODLAR: Siçanlarda dekstran natrium sulfat (DSS) ilə induksiya olunmuş xroniki residiv verən koliti müəyyən etmək. BLG-nin qoruyucu təsirini qiymətləndirmək üçün xəstəlik aktivliyi indeksləri, zədələnmənin histoloji markerləri və proiltihabi sitokin səviyyələri aparılmışdır. BLG-nin bağırsaq mikrobiotasına və bağırsağa təsiri serum GLP-1 səviyyələri və yoğun bağırsaq Gcg, GPR41 və GRP43 ifadəsi, bağırsaq mikrobiota tərkibi, nəcis SCFA səviyyələri və ilkin siçandan GLP-1 ifrazı ilə xarakterizə edilmişdir. Yoğun bağırsaq epitel hüceyrələri SCFA-dan əldə edilən GLP-1 istehsalını təmin edir. Nəticələr: BLG müalicəsi bədən çəkisinin itirilməsini, DAI-ni, yoğun bağırsaq qısalmasını, yoğun bağırsaq toxumasının zədələnməsini və yoğun bağırsaq toxumasında TNF-α, IL-1β və IL-6-nın proiltihabi sitokin səviyyələrini əhəmiyyətli dərəcədə azaltmışdır. Bundan əlavə, BLG müalicəsi kolit siçanlarında yoğun bağırsaq Gcg, GPR41 və GRP43 ifadəsini və serum GLP-1 səviyyələrini əhəmiyyətli dərəcədə bərpa edə bilər və Akkermansia və Prevotellaceae_UCG-001 kimi SCFA istehsal edən bakteriyaları artırmaqla və Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas və Oscillibacter kimi bakteriyaların bolluğunu azaltmaqla. Bundan əlavə, BLG müalicəsi kolit siçanlarının nəcisində SCFA səviyyəsini əhəmiyyətli dərəcədə artıra bilər. Eyni zamanda, in vitro təcrübələr də göstərdi ki, BLG ilə müalicə olunmuş siçanların nəcis ekstraktı GLP-1 ifraz edən ilkin kiçik Siçan yoğun bağırsaq epitel hüceyrələrini əhəmiyyətli dərəcədə stimullaşdıra bilər. Nəticələr: Bu tapıntılar BLG-nin kolit əleyhinə təsirə malik olduğunu göstərir. BLG, ən azı qismən bağırsaq mikrobiotasını modulyasiya etməklə və bağırsaq SCFA-dan əldə edilən GLP-1 istehsalını bərpa etməklə bir terapiya kimi inkişaf etdirilə bilər. Xroniki residiv kolit üçün perspektivli dərmanlar. Açar sözlər: kolit, Ban-Lan-Gen qranulları, bağırsaq mikrobiotası, qısa zəncirli yağ turşuları, GLP-1
Ülseratif kolit (ÜK) yoğun bağırsaq və düz bağırsağın uzunmüddətli iltihabi xəstəliyidir və təkrarlanan ishal, qarın ağrısı, çəki itkisi və selikli-irinli qanlı nəcislə xarakterizə olunur.1 Son zamanlar, Qərb həyat tərzinin getdikcə populyarlaşması ilə Çin də daxil olmaqla, əvvəllər aşağı rast gəlinən ölkələrdə ÜK-nin yayılması artmaqdadır.2 Bu artım ictimai səhiyyə üçün böyük problemlər yaradır və xəstələrin iş qabiliyyəti və həyat keyfiyyəti üçün ciddi nəticələrə səbəb olur. Xüsusilə, ÜK-nin patogenezi əsasən aydın deyil, lakin genetikanın, ətraf mühit amillərinin, bağırsaq mikrobiotasının və immun sisteminin hamısının ÜK-nin inkişafına töhfə verdiyi ümumiyyətlə qəbul edilir.3 Hətta indi də ÜK-nin müalicəsi yoxdur və müalicənin məqsədi klinik olaraq klinik simptomları nəzarətdə saxlamaq, remissiyanı stimullaşdırmaq və saxlamaq, selikli qişanın sağalmasını təşviq etmək və təkrarlanmanı azaltmaqdır. Klassik müalicələrə aminosalisilatlar, kortikosteroidlər, immunosupressantlar və bioloji preparatlar daxildir. Lakin, bu dərmanlar müxtəlif yan təsirlərinə görə istənilən effekti əldə edə bilmir.4 Son zamanlar bir çox klinik tədqiqatlar göstərir ki, ənənəvi Çin təbabəti (TCM)... Aşağı toksikliklə UC-nin aradan qaldırılmasına kömək edir və yeni TCM terapiyalarının inkişafının UC.5-7 üçün perspektivli bir müalicə strategiyası olduğunu göstərir.
Banlangen Qranulları (BLG), Banlangen kökünün su ekstraktından hazırlanmış ənənəvi Çin təbabəti preparatıdır.8 Antiviral effektivliyinə əlavə olaraq, BLG müxtəlif iltihabi vəziyyətlərin müalicəsində potensial iltihab əleyhinə aktivlik nümayiş etdirir.9,10 Bundan əlavə, qlükozinolatlar (R, S-goitrin, progoitrin, epiprorubin və qlükozid Radix isatidisin sulu ekstraktlarından) və nukleozidlərdən (hipoksantin, adenozin, uridin və guanozin) və indigo və indirubin kimi indigo alkaloidləri təcrid olunmuş və müəyyən edilmişdir.11,12 Əvvəlki tədqiqatlar adenozin, uridin və indirubin birləşmələrinin müxtəlif heyvan kolit modellərində güclü antikolit təsirləri göstərdiyini yaxşı sənədləşdirmişdir.13-17 Lakin, BLG-nin kolitdə effektivliyini qiymətləndirmək üçün heç bir sübuta əsaslanan tədqiqat aparılmamışdır. Bu tədqiqatda, C57BL/6 siçanlarında dekstran natrium sulfat (DSS) tərəfindən induksiya edilmiş xroniki residiv kolitə BLG-nin qoruyucu təsirini araşdırdıq və aşkar etdik BLG-nin oral qəbulunun siçanlarda DSS-in yaratdığı xroniki residivləşən yoğun bağırsaq iltihabını əhəmiyyətli dərəcədə zəiflətdiyinə görə, onun tənzimləyici mexanizmləri bağırsaq mikrobiotasının modulyasiyası və bağırsaqdan əldə edilən qlükaqon bənzəri peptid-1 (GLP-1) istehsalının bərpası ilə əlaqələndirilir.
BLG qranulları (şəkərsiz, NMPA tərəfindən təsdiqlənmiş Z11020357; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Pekin, Çin; partiya nömrəsi: 20110966) apteklərdən alınmışdır. DSS (Molekulyar Çəki: 36,000–50,000 Dalton) MP Biologicals (Santa Ana, ABŞ) şirkətindən alınmışdır. Sulfasalazin (SASP) (≥ 98% təmizlik), hematoksilin və eozin Sigma-Aldrich (Sent-Luis, MO, ABŞ) şirkətindən alınmışdır. Siçan TNF-α, IL-1β və IL-6 luminex Elisa analiz dəstləri R&D sistemlərindən (Minneapolis, MN, ABŞ) alınmışdır. Sirkə turşusu, propion turşusu və yağ turşusu Aladdin Industries (Şanxay, Çin) şirkətindən alınmışdır. 2-Etilbutirik turşusu Merck KGaA (Darmştadt, Almaniya) şirkətindən alınmışdır.
6-8 həftəlik erkək C57BL/6 siçan (bədən çəkisi 18-22 q) Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd.-dən (Pekin, Çin) alınmış və 12 saat işıq/qaranlıq dövrü ilə 22 ± 2 °C temperaturda saxlanılmışdır. Siçanlar yeni mühitə uyğunlaşmaq üçün bir həftə ərzində içməli suya sərbəst çıxışı olan standart gəmirici pəhrizi ilə bəslənmişdir. Daha sonra siçanlar təsadüfi olaraq dörd qrupa bölünmüşdür: nəzarət qrupu, DSS model qrupu, SASP ilə müalicə olunmuş qrup (200 mq/kq, oral) və BLG ilə müalicə olunmuş qrup (1 q/kq, oral). Şəkil 1A-da göstərildiyi kimi, əvvəlki tədqiqatımıza görə, əvvəlki tədqiqatımıza görə, eksperimental xroniki residivləşən kolit siçanlarda 5 gün ərzində 1,8% DSS-in üç dövrü ilə, ardından 7 gün ərzində distillə edilmiş su ilə induksiya edilmişdir. SASP və BLG ilə müalicə olunmuş qruplardakı 18 siçan 0-cu gündən başlayaraq hər gün müvafiq olaraq SASP və BLG ilə müalicə olunmuşdur. İlkin təcrübələrə görə, BLG dozası 1 q/kq olaraq təyin edildi. Bu arada, ədəbiyyata görə SASP dozası 200 mq/kq olaraq təyin edildi.4 Nəzarət və DSS model qrupları təcrübə boyunca eyni həcmdə su aldılar.
Şəkil 1 BLG siçanlarda DSS ilə induksiya olunmuş xroniki residivləşən koliti yaxşılaşdırır.(A) Xroniki residivləşən kolitin eksperimental dizaynı və müalicəsi, (B) bədən çəkisinin dəyişməsi, (C) xəstəlik aktivliyi indeksi (DAI) balı, (D) yoğun bağırsağın uzunluğu, (E) yoğun bağırsağın reprezentativ təsviri, (F) H&E boyanması Yoğun bağırsağın (böyütmə, ×100) və (G) histoloji balı. Məlumatlar orta ± SEM (n = 6) kimi təqdim olunur.##p < 0.01 və ya ###p < 0.001 vs nəzarət (Con) qrupu; *p < 0.05 və ya **p < 0.01 və ya ***p < 0.001 vs DSS qrupu.
Bədən çəkisi, nəcis tutarlılığı və rektal qanaxma gündəlik qeyd edildi. Xəstəlik aktivliyi indeksi (XAKİ) əvvəllər təsvir edildiyi kimi bədən çəkisi, nəcis tutarlılığı və rektal qanaxma ballarının birləşdirilməsi ilə müəyyən edildi.19 Təcrübənin sonunda bütün siçanlar evtanaziya edildi və sonrakı təcrübələr üçün qan, nəcis və yoğun bağırsaq toplandı.
Yoğun bağırsaq toxuması formalinlə fiksasiya edilmiş və parafinə basdırılmışdır. 5 mikron kəsiklər hazırlanmış və hematoksilin-eozin (H&E) ilə boyanmış, sonra korlanmış və əvvəllər təsvir edildiyi kimi bal verilmişdir.19
Yoğun bağırsaq toxumasının ümumi RNT-si Trizol reagenti (Invitrogen, Carlsbad, CA) ilə çıxarıldı, ardınca isə tərs transkriptaza ilə kDNT ekstraksiyası (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Yaponiya) aparıldı. Kəmiyyət PZR-i SYBR Green Master (Roche, Basel, İsveçrə) ilə real vaxt PZR sistemi istifadə edilərək aparıldı. Hədəf gen transkriptləri β-aktinə normallaşdırıldı və məlumatlar 2-ΔΔCT metodu ilə təhlil edildi. Gen praymer ardıcıllıqları Cədvəl 1-də göstərilmişdir.
İlkin siçan yoğun bağırsaq epitel hüceyrələrinin təcrid edilməsi və kulturası əvvəllər təsvir edildiyi kimi aparılmışdır.20 Qısaca desək, 6-8 həftəlik siçanların yoğun bağırsaqları əvvəlcə servikal çıxıqla kəsildikdən sonra çıxarıldı, sonra uzununa açıldı, Hanks Balanced Duz Məhlulu (HBSS, kalsium və maqneziumsuz) ilə işləndi və 0,5-1 mm kiçik parçalara bölündü. Daha sonra toxumalar sərbəst DMEM mühitində 0,4 mq/ml kollagenaza XI (Sigma, Poole, Böyük Britaniya) ilə həzm edildi və otaq temperaturunda 5 dəqiqə ərzində 300 xg-də santrifüj edildi. Qranul DMEM mühitində (10% fetal mal-qara serumu, 100 Vahid/ml penisilin və 100 µq/ml streptomisin ilə əlavə edilmiş) 37 °C-də yenidən əridildi və neylon tordan keçirildi (məsamə ölçüsü ~250 µm). Yoğun bağırsaq epitel hüceyrələrinin alikvotları şüşə dibli qablara yerləşdirildi və sirkə turşusu, propion turşusu, yağ turşusu və siçan nəcisi ilə inkubasiya edildi. ekstraktları 37°C-də 2 saat, 5% CO2-də saxlayın.
Yoğun bağırsaq toxuması PBS ilə homogenləşdirilmiş və yoğun bağırsaq toxumasında sitokinlər IL-6, TNF-α və IL-1β səviyyələri luminex ELISA analiz dəstləri (R&D sistemləri, Minneapolis, MN, ABŞ) istifadə edilərək aşkar edilmişdir. Eynilə, istehsalçının təlimatlarına uyğun olaraq ilkin siçan yoğun bağırsaq epitel hüceyrələrinin serum və kultura mühitində GLP-1 səviyyələri ELISA dəsti (Bioswamp, Wuhan, Çin) ilə təyin edilmişdir.
Nəcisdən ümumi DNT DNT ekstraksiya dəsti (Tiangen, Çin) istifadə edilərək çıxarıldı. DNT-nin keyfiyyəti və miqdarı müvafiq olaraq 260 nm/280 nm və 260 nm/230 nm nisbətlərində ölçüldü. Daha sonra, hər bir ekstraksiya edilmiş DNT-dən şablon kimi istifadə edərək, müxtəlif bölgələrdə 16S rRNA geninin V3-V4 bölgələrini gücləndirmək üçün xüsusi 338F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) və 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) praymerləri istifadə edildi. PCR məhsulları QIAquick Gel Ekstraksiya Dəsti (QIAGEN, Almaniya) istifadə edilərək təmizləndi, real vaxt PCR ilə ölçüldü və IlluminaMiseq PE300 ardıcıllıq platforması (Illumina Inc., CA, ABŞ) istifadə edilərək ardıcıllıqla təyin edildi. Bioinformatika təhlili üçün məlumatların emalı əvvəllər bildirilən protokollara uyğun olaraq həyata keçirildi.21,22 Bir sözlə, xam ekspres fayllarını süzgəcdən keçirmək üçün Cutadapt (V1.9.1) istifadə edin. OTU-lar... UPARSE (versiya 7.0.1001) istifadə edilərək 97% oxşarlıq kəsiyi ilə klasterləşdirilmiş və ximer ardıcıllıqları aradan qaldırmaq üçün UCHIME istifadə edilmişdir. İcma tərkibinin təhlili və təsnifatı SILVA ribosomal RNT gen verilənlər bazasına əsaslanan RDP təsnifatçısından (http://rdp.cme.msu.edu/) istifadə edilərək aparılmışdır.
Qısa zəncirli yağ turşularının (sirkə turşusu, propion turşusu və butir turşusu) səviyyələri əvvəllər Tao və digərləri tərəfindən təsvir edildiyi kimi, bəzi dəyişikliklərlə ölçülmüşdür.23 Qısaca desək, 100 mq nəcis əvvəlcə 0,4 ml deionlaşdırılmış suda həll edilmiş, ardınca 0,1 ml 50% sulfat turşusu və 0,5 ml 2-etilbutir turşusu (daxili standart) əlavə edilmiş, sonra homogenləşdirilmiş və 4°C-də qızdırılmışdır. C temperaturda 15 dəqiqə ərzində 12000 dövr/dəq sürətlə santrifüj edildi. Supernatant 0,5 ml efirlə ekstraksiya edildi və analiz üçün GC-yə yeridildi. Qaz xromatoqrafiyası (GX) analizi üçün nümunələr alov ionlaşma detektoru (FID) ilə təchiz olunmuş GC-2010 Plus qaz xromatoqrafı (Shimadzu, Inc.) istifadə edilərək təhlil edildi. Ayrılma 30 m × 0,53 mm × 0,3 μm ölçülü ZKAT-624 sütunu (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., Çin) istifadə edilərək həyata keçirildi. Məlumatlar GX həll proqram təminatı (Shimadzu, Inc.) istifadə edilərək əldə edildi. Bölünmə nisbəti 10:1, daşıyıcı qaz azot və axın sürəti 6 ml/dəq idi. Enjeksiyon həcmi 1 μL idi. Enjektor və detektorun temperaturu 300°C idi. Sobanın temperaturu 140°C-də 13,5 dəqiqə saxlanıldı, sonra 250°C-yə qədər artırıldı. 120°C/dəq sürətlə; temperatur 5 dəqiqə saxlanıldı.
Məlumatlar orta ± orta qiymətin standart xətası (SEM) kimi təqdim olunur. Məlumatların əhəmiyyəti birtərəfli ANOVA və ardınca Duncanın çoxsaylı diapazon testi ilə qiymətləndirilmişdir. Bütün hesablamalar üçün GraphPad Prism 5.0 proqram təminatı (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, ABŞ) istifadə edilmiş və p < 0.05 statistik cəhətdən əhəmiyyətli hesab edilmişdir.
Məlumdur ki, UC şiddətli qarın ağrısı, ishal və qanaxma ilə müşayiət olunan xroniki residivləşən kolit xəstəliyidir. Buna görə də, BLG-nin kolit əleyhinə effektivliyini qiymətləndirmək üçün siçanlarda DSS ilə induksiya olunmuş xroniki residivləşən kolit müəyyən edilmişdir (Şəkil 1A). Nəzarət qrupu ilə müqayisədə DSS model qrupundakı siçanlarda bədən çəkisi əhəmiyyətli dərəcədə azalmış və DAI daha yüksək idi və bu dəyişikliklər 24 günlük BLG müalicəsindən sonra əhəmiyyətli dərəcədə geri döndü (Şəkil 1B və C). Yoğun bağırsaq qısalması UC-nin vacib bir əlamətidir. Şəkil 1D və E-də göstərildiyi kimi, DSS alan siçanların yoğun bağırsaq uzunluğu əhəmiyyətli dərəcədə qısalmış, lakin BLG müalicəsi ilə yüngülləşmişdir. Daha sonra yoğun bağırsaq iltihabını qiymətləndirmək üçün histopatoloji analiz aparılmışdır. H&E boyalı şəkilləri və patoloji balları göstərdi ki, DSS tətbiqi yoğun bağırsaq arxitekturasını əhəmiyyətli dərəcədə pozmuş və kriptlərin məhv olmasına səbəb olmuşdur, BLG müalicəsi isə kriptlərin məhv olmasını və patoloji balları əhəmiyyətli dərəcədə azaltmışdır (Şəkil 1F və G). Xüsusilə, 1 q/kq dozada BLG-nin qoruyucu təsiri SASP-nin dozada qoruyucu təsiri ilə müqayisə edilə bilər. 200 mq/kq. Ümumilikdə, bu tapıntılar BLG-nin siçanlarda DSS-in yaratdığı xroniki residivləşən kolitin şiddətini azaltmaqda təsirli olduğunu göstərir.
TNF-α, IL-1β və IL-6 yoğun bağırsaq iltihabının vacib iltihab markerləridir. Şəkil 2A-da göstərildiyi kimi, DSS, kontrol qrupu ilə müqayisədə yoğun bağırsaqda TNF-α, IL-1β və IL-6 gen ifadəsində əhəmiyyətli bir artıma səbəb oldu. BLG-nin tətbiqi bu DSS vasitəçiliyi ilə baş verən dəyişiklikləri əhəmiyyətli dərəcədə geri qaytara bilər. Daha sonra, yoğun bağırsaq toxumasında iltihab sitokinləri TNF-α, IL-1β və IL-6 səviyyələrini təyin etmək üçün ELISA-dan istifadə etdik. Nəticələr həmçinin göstərdi ki, DSS ilə müalicə olunan siçanlarda yoğun bağırsaqda TNF-α, IL-1β və IL-6 səviyyələri əhəmiyyətli dərəcədə artmışdır, BLG müalicəsi isə bu artımları azaltmışdır (Şəkil 2B).
Şəkil 2 BLG, DSS ilə müalicə olunmuş siçanların yoğun bağırsaqlarında TNF-α, IL-1β və IL-6 proiltihab sitokinlərinin gen ifadəsini və istehsalını inhibə edir.(A) TNF-α, IL-1β və IL-6-nın yoğun bağırsaq gen ifadəsi; (B) TNF-α, IL-1β və IL-6-nın yoğun bağırsaq zülal səviyyələri. Məlumatlar orta ± SEM (n = 4–6) kimi təqdim olunur.#p < 0.05 və ya ##p < 0.01 və ya ###p < 0.001 vs nəzarət (Con) qrupu; *p < 0.05 və ya **p < 0.01 vs DSS qrupu.
Bağırsaq disbiozu UC-nin patogenezində çox vacibdir.24 DSS ilə müalicə olunmuş siçanların bağırsaq mikrobiotasını modulyasiya edib-etmədiyini araşdırmaq üçün bağırsaq tərkibinin bakterial icmasını təhlil etmək üçün 16S rRNA ardıcıllığı aparılmışdır. Venn diaqramı göstərir ki, üç qrup 385 OTU paylaşır. Eyni zamanda, hər qrupun özünəməxsus OTU-ları var idi (Şəkil 3A). Bundan əlavə, Şəkil 3B və C-də göstərilən Chao1 indeksi və Shannon indeksi göstərdi ki, BLG ilə müalicə olunmuş siçanlarda bağırsaq mikrobiotasının icma müxtəlifliyi azalıb, çünki Shannon indeksi BLG ilə müalicə olunmuş qrupda əhəmiyyətli dərəcədə azalıb. Üç qrup arasında klasterləşmə nümunələrini müəyyən etmək üçün əsas komponent təhlili (PCA) və əsas koordinat təhlili (PCoA) istifadə edilmişdir və DSS ilə müalicə olunmuş siçanların icma strukturunun BLG müalicəsindən sonra aydın şəkildə ayrıldığını göstərmişdir (Şəkil 3D və E). Bu məlumatlar BLG müalicəsinin DSS ilə induksiya olunmuş kolitli siçanların icma strukturuna əhəmiyyətli dərəcədə təsir etdiyini göstərir.
Şəkil 3 BLG, DSS ilə induksiya olunmuş kolitli siçanlarda bağırsaq mikrobiotasının müxtəlifliyini dəyişdirir.(A) OTU-nun Venn diaqramı, (B) Chao1 indeksi, (C) Şennon zənginlik indeksi, (D) OTU-nun Əsas Komponent Təhlili (PCA) bal qrafiki, (E) OTU Əsas Koordinat Təhlili (PCoA) balı Şəkil. Məlumatlar orta ± SEM (n = 6) kimi təqdim olunur.**p < 0.01 vs DSS qrupu.
Nəcis mikrobiotasındakı spesifik dəyişiklikləri qiymətləndirmək üçün bağırsaq mikrobiotasının tərkibini bütün taksonomik səviyyələrdə təhlil etdik. Şəkil 4A-da göstərildiyi kimi, bütün qruplardakı əsas fila Firmicutes və Bacteroidetes, ardınca Verrucomicrobia idi. DSS ilə müalicə olunmuş siçanların nəcis mikrobial icmalarında Firmicutes və Firmicutes/Bacteroidetes nisbətlərinin nisbi bolluğu nəzarət siçanları ilə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə artmış və bu dəyişikliklər BLG müalicəsindən sonra əhəmiyyətli dərəcədə geri çevrilmişdir. Xüsusilə, BLG müalicəsi DSS ilə induksiya olunmuş kolitli siçanların nəcisində Verrucobacteriumun nisbi bolluğunu əhəmiyyətli dərəcədə artırmışdır. Ev təsərrüfatı səviyyəsində nəcis mikrobial icmaları Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae və Prevotellaceae tərəfindən işğal edilmişdir (Şəkil 4B). DSS qrupu ilə müqayisədə BLG-nin azalması Akkermansiaceae-nin bolluğunu artırmış, lakin Lachnospiraceae və Ruminococcaceae-nin bolluğunu azaltmışdır. Xüsusilə, cins səviyyəsində Nəcis mikrobiotası Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia və Prevotellaceae_UCG-001 tərəfindən işğal edilmişdir (Şəkil 4C). Bu tapıntı həmçinin BLG müalicəsinin DSS probleminə cavab olaraq mikrobiota balanssızlığını effektiv şəkildə aradan qaldırdığını göstərdi. Bu, Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas və Oscillibacter-də azalma və Akkermansia və Prevotellaceae_UCG-001-də artımla xarakterizə olunurdu.
Şəkil 4 BLG, DSS ilə induksiya olunmuş kolit siçanlarında bağırsaq mikrobiotasının bolluğunu dəyişdirir.(A) Filum səviyyəsində bağırsaq mikrobiotasının bolluğu; (B) Ailə səviyyəsində bağırsaq mikrobiotasının bolluğu; (C) Cins səviyyəsində bağırsaq mikrobiotasının bolluğu. Məlumatlar orta ± SEM (n = 6) kimi təqdim olunur.#p < 0.05 və ya ###p < 0.001 vs nəzarət (Con) qrupu; *p < 0.05 və ya **p < 0.01 və ya ***p < 0.001 vs DSS qrupu.
Qısa zəncirli yağ turşularının (QZYA) Akkermansia və Prevotellaceae_UCG-001-in əsas metabolitləri, asetat, propionat və butiratın isə bağırsaq lümenində ən çox rast gəlinən QZYA olduğunu nəzərə alsaq, 25-27-ci illərdə hələ də tədqiqatımızdayıq. Şəkil 5-də göstərildiyi kimi, DSS ilə müalicə olunan qrupda nəcis asetat, propionat və butirat konsentrasiyaları əhəmiyyətli dərəcədə azalmış, BLG müalicəsi isə bu azalmanı əsasən boğmuş ola bilər.
Şəkil 5. BLG, DSS ilə induksiya olunmuş kolitli siçanların nəcisində SCFA səviyyələrini artırır.(A) Nəcisdə sirkə turşusunun miqdarı; (B) nəcisdə propion turşusunun miqdarı; (C) nəcisdə yağ turşusunun miqdarı. Məlumatlar orta ± SEM (n = 6) kimi təqdim olunur.#p < 0.05 və ya ##p < 0.01 nəzarət (Con) qrupuna qarşı; *p < 0.05 və ya **p < 0.01 DSS qrupuna qarşı.
Cins səviyyəli diferensial SCFA və nəcis mikrobiotası arasında Pearson korrelyasiya əmsalını daha da hesabladıq. Şəkil 6-da göstərildiyi kimi, Akkermansia propion turşusu (Pearson = 0.4866) və yağ turşusu (Pearson = 0.6192) istehsalı ilə müsbət korrelyasiyaya malik idi. Bunun əksinə olaraq, həm Enteromonas, həm də Oscillobacter asetat istehsalı ilə mənfi əlaqəli idi, Pearson əmsalları müvafiq olaraq 0.4709 və 0.5104 idi. Eynilə, Ruminococcaceae_UCG-014 müvafiq olaraq propion turşusu (Pearson = 0.4508) və yağ turşusu (Pearson = 0.5842) istehsalı ilə mənfi korrelyasiyaya malik idi.
Şəkil 6. Diferensial SCFA-lar və yoğun bağırsaq mikrobları arasında Pearson korrelyasiya təhlili.(A) Sirkə turşusu ilə Enteromonas; (B) Sirkə turşusu ilə sarsıntı bacillus; (C) Akkermansiya və propion turşusu; (D) Propion turşusu ilə Ruminococcus_UCG-014; (E) Yağ turşusu ilə Akkermansiya; (F)) Yağ turşusu ilə Ruminococcus _UCG-014.
Qlükaqona bənzər peptid-1 (GLP-1) iltihab əleyhinə xüsusiyyətlərə malik proqlükaqonun (Gcg) hüceyrə tipinə xas post-translyasiya məhsuludur.28 Şəkil 7-də göstərildiyi kimi, DSS Gcg mRNA ifadəsində əhəmiyyətli dərəcədə azalmaya səbəb oldu. Kolon və BLG müalicəsi DSS-in induksiya etdiyi Gcg azalmasını nəzarət qrupu ilə müqayisədə əhəmiyyətli dərəcədə geri qaytara bildi (Şəkil 7A). Eyni zamanda, DSS ilə müalicə olunan qrupda serumdakı GLP-1 səviyyəsi əhəmiyyətli dərəcədə azaldı və BLG müalicəsi bu azalmanın qarşısını əsasən ala bildi (Şəkil 7B). Qısa zəncirli yağ turşuları G-zülalı ilə əlaqəli reseptor 43 (GRP43) və G-zülalı ilə əlaqəli reseptor 41 (GRP41) aktivləşməsi vasitəsilə GLP-1 ifrazını stimullaşdıra bildiyindən, biz həmçinin kolit siçanlarının yoğun bağırsaqlarında GPR41 və GRP43-ü araşdırdıq və DSS problemindən sonra GRP43 və GPR41-in yoğun bağırsaq mRNA ifadəsinin əhəmiyyətli dərəcədə azaldığını və BLG müalicəsinin bu azalmaları effektiv şəkildə aradan qaldıra biləcəyini aşkar etdik (Şəkil 7C və D).
Şəkil 7 BLG, DSS ilə müalicə olunmuş siçanlarda serum GLP-1 səviyyələrini və yoğun bağırsaq Gcg, GPR41 və GRP43 mRNA ifadəsini artırır.(A) Yoğun bağırsaq toxumasında Gcg mRNA ifadəsi; (B) Serumda GLP-1 səviyyəsi; (C) Yoğun bağırsaq toxumasında GPR41 mRNA ifadəsi; (D) Yoğun bağırsaq toxumasında GPR43 mRNA ifadəsi. Məlumatlar orta ± SEM (n = 5–6) kimi təqdim olunur.#p < 0.05 və ya ##p < 0.01 vs nəzarət (Con) qrupu; *p < 0.05 vs DSS qrupu.
BLG müalicəsi DSS ilə müalicə olunmuş siçanlarda serum GLP-1 səviyyələrini, yoğun bağırsağın Gcg mRNA ifadəsini və nəcis SCFA səviyyələrini artıra bildiyindən, biz asetat, propionat və butiratı, eləcə də nəzarət (F-Con), DSS kolit (F-Con) -DSS) və BLG ilə müalicə olunmuş kolit (F-BLG) siçanlarında GLP-1-in birincil siçan yoğun bağırsağın epitel hüceyrələrindən sərbəst buraxılması üzərində daha ətraflı araşdırdıq. Şəkil 8A-da göstərildiyi kimi, müvafiq olaraq 2 mM sirkə turşusu, propion turşusu və butir turşusu ilə müalicə olunmuş birincil siçan yoğun bağırsağın epitel hüceyrələri əvvəlki tədqiqatlarla uyğun olaraq GLP-1-in sərbəst buraxılmasını əhəmiyyətli dərəcədə stimullaşdırdı.29,30 Eynilə, bütün F-Con, F-DSS və F-BLG (0,25 q nəcisə bərabərdir) ilkin siçan yoğun bağırsağın epitel hüceyrələrindən GLP-1-in sərbəst buraxılmasını əhəmiyyətli dərəcədə stimullaşdırdı. Xüsusilə, F-DSS ilə müalicə olunmuş birincil siçan yoğun bağırsağın epitel hüceyrələri tərəfindən sərbəst buraxılan GLP-1 miqdarı F-Con və F-BLG ilə müalicə olunmuş birincil siçanlara nisbətən daha aşağı idi. yoğun bağırsaq epitel hüceyrələri. (Şəkil 8B). Bu məlumatlar göstərir ki, BLG müalicəsi bağırsaq SCFA-dan əldə edilən GLP-1 istehsalını əhəmiyyətli dərəcədə bərpa etmişdir.
Şəkil 8 BLG-dən əldə edilən SCFA, ilkin siçan yoğun bağırsağı epitel hüceyrələrindən GLP-1-in ifrazını stimullaşdırır.(A) Sirkə turşusu, propion turşusu və yağ turşusu ilkin siçan yoğun bağırsağı epitel hüceyrələrindən GLP-1-in ifrazını stimullaşdırır; (B) nəcis ekstraktları F-Con, F-DSS və F-BLG ilkin siçan yoğun bağırsağı epitel hüceyrələrini stimullaşdırır. Sərbəst buraxılan GLP-1 miqdarı. Yoğun bağırsağı epitel hüceyrələrinin alikvotları şüşə dibli Petri qablarına yerləşdirilib və müvafiq olaraq 2 mM sirkə turşusu, propion turşusu, yağ turşusu və nəcis ekstraktları F-Con, F-DSS və F-BLG (0,25 q nəcisə bərabərdir) ilə işlənib. 37°C-də 2 saat, müvafiq olaraq 5% CO2. İlkin siçan yoğun bağırsaq epitel hüceyrələrindən ifraz olunan GLP-1 miqdarı ELISA ilə aşkar edilmişdir. Məlumatlar orta ± SEM (n = 3) kimi təqdim olunur.#p < 0.05 və ya ##p < 0.01 vs. blank və ya F-Con; *p < 0.05 vs. F-DSS.
Qısaltmalar: Ace, sirkə turşusu; Pro, propion turşusu; lakin, yağ turşusu; F-Con, nəzarət siçanlarından alınan nəcis ekstraktı; F-DSS, kolit siçanlarından alınan nəcis ekstraktı; F-BLG, BLG ilə müalicə olunmuş yoğun bağırsaqdan alınan iltihabi siçanların nəcis ekstraktları.
Ümumdünya Səhiyyə Təşkilatı tərəfindən refrakter xəstəlik kimi siyahıya alınan UC qlobal təhlükəyə çevrilir; Lakin xəstəliyin proqnozlaşdırılması, qarşısının alınması və müalicəsi üçün effektiv metodlar hələ də məhduddur. Buna görə də, UC üçün yeni təhlükəsiz və effektiv terapevtik strategiyaların araşdırılmasına və hazırlanmasına təcili ehtiyac var. Ənənəvi Çin təbabəti preparatları perspektivli bir seçimdir, çünki əsrlər boyu Çin əhalisində UC-nin müalicəsində bir çox ənənəvi Çin təbabəti preparatlarının təsirli olduğu göstərilmişdir və hamısı əsasən insanlar və heyvanlar üçün zərərsiz olan bioloji üzvi və təbii materiallardır.31,32 Bu tədqiqatın məqsədi UC-nin müalicəsi üçün təhlükəsiz və effektiv ənənəvi Çin təbabəti preparatı axtarmaq və onun təsir mexanizmini araşdırmaq idi.BLG qripin müalicəsində istifadə edilən tanınmış Çin bitki mənşəli formuludur.8,33 Bizim laboratoriyamızda və digərlərində aparılan işlər göstərdi ki, BLG ilə eyni xammaldan emal edilmiş ənənəvi Çin təbabəti məhsulu olan indigo insanlarda və heyvanlarda UC-nin müalicəsində əhəmiyyətli dərəcədə effektivlik göstərir.4,34 Lakin, BLG-nin kolit əleyhinə təsirləri və onun təsirləri Mexanizm aydın deyil. Hazırkı tədqiqatda nəticələrimiz göstərir ki, BLG bağırsağın modulyasiyası ilə əlaqəli olan DSS-in yaratdığı yoğun bağırsaq iltihabını effektiv şəkildə azaldır. mikrobiota və bağırsaqdan əldə edilən GLP-1 istehsalının bərpası.
Məlumdur ki, UC çəki itkisi, ishal, rektal qanaxma və geniş yoğun bağırsaq mukozasının zədələnməsi kimi tipik klinik xüsusiyyətlərə malik residiv dövrləri ilə xarakterizə olunur.35 Beləliklə, xroniki residiv kolit beş gün ərzində üç dövr 1,8% DSS verilməklə, ardınca yeddi gün içməli su ilə tətbiq edilmişdir. Şəkil 1B-də göstərildiyi kimi, dəyişkən çəki itkisi və DAI balları xroniki residiv kolitin uğurlu induksiyasını göstərir. BLG ilə müalicə olunan qrupdakı siçanlar 8-ci gündən etibarən yuxarıya doğru sağalma göstərdilər ki, bu da 24-cü gündən əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənirdi. Eyni dəyişikliklər DAI balında da müşahidə edildi ki, bu da kolitin klinik yaxşılaşmasında yaxşılaşmanı göstərir. Yoğun bağırsaq zədələnməsi və iltihab statusu baxımından yoğun bağırsaq uzunluğu, yoğun bağırsaq toxumasının zədələnməsi və yoğun bağırsaq toxumasında gen ifadəsi və proiltihab sitokinləri TNF-α, IL-1β və IL-6 istehsalı da BLG müalicəsindən sonra xeyli yaxşılaşmışdır. Ümumilikdə, bu nəticələr BLG-nin siçanlarda xroniki residiv kolitin müalicəsində təsirli olduğunu açıq şəkildə göstərir.
BLG farmakoloji təsirlərini necə göstərir? Əvvəlki çoxsaylı tədqiqatlar bağırsaq mikrobiotasının UC-nin patogenezində əsas rol oynadığını göstərib və mikrobiom əsaslı və mikrobiom hədəfli terapiyalar UC-nin müalicəsi üçün çox cəlbedici bir strategiya kimi ortaya çıxıb. Bu tədqiqatda biz BLG müalicəsinin bağırsaq mikrobiota tərkibində əhəmiyyətli dəyişikliklərə səbəb olduğunu göstərdik ki, bu da BLG-nin DSS ilə induksiya olunmuş kolitə qarşı qoruyucu təsirinin bağırsaq mikrobiotasının modulyasiyası ilə əlaqəli olduğunu göstərir. Bu müşahidə bağırsaq mikrobiotasının homeostazının yenidən proqramlaşdırılmasının TCM preparatlarının effektivliyini anlamaq üçün vacib bir yanaşma olduğu fikri ilə uyğun gəlir.36,37 Qeyd etmək lazımdır ki, Akkermansia bağırsağın selikli təbəqəsində yaşayan, musinləri parçalayan, propion turşusu istehsal edən, qədəh hüceyrə differensiasiyasını stimullaşdıran və selikli qişanın baryer bütövlüyü funksiyasını qoruyan Qram-mənfi və ciddi şəkildə anaerob bakteriyadır.26 Çoxsaylı klinik və heyvan məlumatları Akkermansianın sağlam selikli qişa ilə yüksək dərəcədə əlaqəli olduğunu göstərir.38 və Akkermansia spp.-nin oral qəbulu. selikli qişa iltihabını əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşdıra bilər.39 Mövcud məlumatlarımız göstərir ki, BLG müalicəsindən sonra Akkermansia nisbi bolluğu əhəmiyyətli dərəcədə artır. Bundan əlavə, Prevotellaceae_UCG-001 SCFA istehsal edən bir bakteriyadır.27 Çoxsaylı tədqiqatlar göstərdi ki, Prevotellaceae_UCG-001 kolitli heyvanların nəcisində aşağı nisbi bolluqda tapılıb.40,41 Mövcud məlumatlarımız həmçinin göstərir ki, BLG müalicəsi DSS ilə müalicə olunmuş siçanların yoğun bağırsaqlarında Prevotellaceae_UCG-001 nisbi bolluğunu əhəmiyyətli dərəcədə artıra bilər. Bunun əksinə olaraq, Oscillibacter mezofil, sırf anaerob bir bakteriyadır.42 Oscillibacter nisbi bolluğunun UC siçanlarında əhəmiyyətli dərəcədə artdığını və IL-6 və IL-1β səviyyələri və patoloji ballarla əhəmiyyətli dərəcədə müsbət korrelyasiya etdiyini bildirdi.43,44 Qeyd etmək lazımdır ki, BLG müalicəsi DSS ilə müalicə olunmuş siçanların nəcisində Oscillibacter nisbi bolluğunu əhəmiyyətli dərəcədə azaltdı. Qeyd etmək lazımdır ki, bu BLG dəyişdirilmiş bakteriyalar ən çox SCFA istehsal edən bakteriya idi. Çoxsaylı əvvəlki tədqiqatlar SCFA-ların yoğun bağırsaq iltihabına və bağırsaq epitelinin bütövlüyünün qorunmasına potensial faydalı təsirlərini nümayiş etdirmişdir.45,46 Hazırkı məlumatlarımız həmçinin müşahidə etmişdir ki, DSS ilə müalicə olunmuş nəcisdə SCFA asetat, propionat və butirat konsentrasiyaları BLG ilə müalicə olunmuş siçanlarda xeyli artmışdır. Ümumilikdə, bu tapıntılar BLG müalicəsinin xroniki residivləşən kolitli siçanlarda DSS ilə induksiya olunmuş SCFA istehsal edən bakteriyaları effektiv şəkildə artıra biləcəyini açıq şəkildə göstərir.
GLP-1 əsasən ileum və yoğun bağırsaqda istehsal olunan inkretindir və mədə boşalmasının gecikməsində və yeməkdən sonra qan qlükozasının aşağı salınmasında mühüm rol oynayır.47 Dəlillər göstərir ki, GLP-1 reseptor agonisti və GLP-1 nanotibbi olan dipeptidil peptidaz (DPP)-4 siçanlarda bağırsaq iltihabını effektiv şəkildə aradan qaldıra bilər.48-51 Əvvəlki tədqiqatlarda bildirildiyi kimi, yüksək SCFA konsentrasiyaları insanlarda və siçanlarda plazma GLP-1 səviyyələri ilə əlaqələndirilmişdir.52 Hazırkı məlumatlarımız göstərir ki, BLG müalicəsindən sonra serum GLP-1 səviyyələri və Gcg mRNA ifadəsi əhəmiyyətli dərəcədə artmışdır. Eynilə, DSS ilə müalicə olunan kolit siçanlarından nəcis ekstraktları ilə stimullaşdırma ilə müqayisədə BLG ilə müalicə olunmuş kolit siçanlarından nəcis ekstraktları ilə stimullaşdırmadan sonra yoğun bağırsaq kulturalarında GLP-1 ifrazı əhəmiyyətli dərəcədə artmışdır. SCFA-lar GLP-1-in ifrazına necə təsir edir? Qven Tolherst və digərləri. SCFA-nın GRP43 və GPR41 vasitəsilə GLP-1 sekresiyasını stimullaşdıra biləcəyi bildirildi.29 Mövcud məlumatlarımız həmçinin göstərir ki, BLG müalicəsi DSS ilə müalicə olunmuş siçanların yoğun bağırsaqlarında GRP43 və GPR41 mRNA ifadəsini əhəmiyyətli dərəcədə artırır. Bu məlumatlar göstərir ki, BLG müalicəsi GRP43 və GPR41-i aktivləşdirərək SCFA tərəfindən təşviq edilən GLP-1 istehsalını bərpa edə bilər.
BLG, Çində uzunmüddətli reseptsiz (OTC) dərmandır. Kunmin siçanlarında BLG-nin maksimum tolere edilən dozası 80 q/kq-dır və kəskin toksiklik müşahidə edilməyib.53 Hal-hazırda, insanlarda tövsiyə olunan BLG dozası (şəkərsiz) gündə 9-15 q-dır (gündə 3 dəfə). Tədqiqatımız göstərdi ki, 1 q/kq dozada BLG siçanlarda DSS-in yaratdığı xroniki residiv koliti yaxşılaşdırıb. Bu doza klinik olaraq istifadə edilən BLG dozasına yaxındır. Tədqiqatımız həmçinin aşkar etdi ki, onun təsir mexanizmi, ən azı qismən, bağırsaq mikrobiotasındakı dəyişikliklər, xüsusən də Akkermansia və Prevotellaceae_UCG-001 kimi SCFA istehsal edən bakteriyaların bağırsaqdan əldə edilən GLP-1 istehsalını bərpa etməsi ilə vasitəçilik olunur. Bu tapıntılar göstərir ki, BLG klinik kolit müalicəsi üçün potensial terapevtik vasitə kimi daha çox nəzərdən keçirilməyə layiqdir. Lakin, bağırsaq mikrobiotasını modulyasiya etdiyi dəqiq mexanizm mikrobiota çatışmazlığı olan siçanlar və nəcis bakteriyası transplantasiyası ilə təsdiqlənməlidir.
Ace, sirkə turşusu; but, butir turşusu; BLG, pandan; DSS, dekstran natrium sulfat; DAI, xəstəlik aktivliyi indeksi; DPP, dipeptidil peptidaz; FID, alov ionlaşma detektoru; F-Con, nəzarət siçanlarının nəcis ekstraktları; F-DSS, DSS kolit siçanlarının nəcis ekstraktları; F-BLG, BLG ilə müalicə olunmuş kolit siçanlarının nəcis ekstraktları; GLP-1, qlükaqona bənzər peptid-1; Gcg, qlükagon; qaz xromatoqrafiyası, qaz xromatoqrafiyası; GRP43, G zülalı ilə əlaqəli reseptor 43; GRP41, G zülalı ilə əlaqəli reseptor 41; H&E, hematoksilin-eozin; HBSS, Hanks Balanslaşdırılmış Duz Məhlulu; OTC, OTC; PCA, əsas komponent təhlili; PCoA, əsas koordinat təhlili; Pro, propion turşusu; SASP, sulfasalazin; SCFA, qısa zəncirli yağ turşuları; Çin təbabəti, ənənəvi Çin təbabəti; Xərçəngli kolit, ülseratif kolit.
Bütün eksperimental protokollar Pekin Universitetinin Şençjen-Honkonq Elm və Texnologiya Universiteti Tibb Mərkəzinin (Şençjen, Çin) Heyvan Etikası Komitəsi tərəfindən İnstitusional Təlimatlara və Heyvan Qaydalarına (etika nömrəsi A2020157) uyğun olaraq təsdiq edilmişdir.
Bütün müəlliflər konsepsiya və dizayn, məlumatların toplanması və ya məlumatların təhlili və təfsirinə əhəmiyyətli töhfələr vermişlər; məqalənin hazırlanmasında və ya vacib intellektual məzmunun tənqidi şəkildə yenidən işlənməsində iştirak etmişlər; əlyazmanı mövcud jurnala təqdim etməyə razılıq vermişlər; nəhayət, nəşr üçün versiyanı təsdiqləmişlər; İşin bütün aspektlərinə görə məsuliyyət daşımışlar.
Bu iş Çin Milli Təbiət Elmləri Fondu (81560676 və 81660479), Şençjen Universitetinin birinci dərəcəli layihəsi (86000000210), Şençjen Elm və Texnologiya İnnovasiya Komitəsi Fondu (JCYJ20210324093810026) və Quanqdonq Əyalət Tibb Elmi və Texnologiya Tədqiqat Fondu (A2020157 və A2020272), Quyçjou Tibb Universitetinin Əczaçılıq Fondu (Açar Laboratoriya tərəfindən maliyyələşdirilir) (YWZJ2020-01) və Pekin Universitetinin Şençjen Xəstəxanası (JCYJ2018009) tərəfindən dəstəklənib.
1. Tang B, Zhu J, Zhang B və b. Siçanlarda dekstran natrium sulfatla induksiya olunmuş eksperimental kolitdə triptolinin iltihab əleyhinə agent kimi terapevtik potensialı. pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. Kaplan GG. Qlobal İBH yükü: 2015-ci ildən 2025-ci ilə qədər. Nat Rev Gastroenterol Hepatol.2015;12:720–727.doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. Peng J, Zheng TT, Li Xue və b. Bitki mənşəli alkaloidlər: iltihabi bağırsaq xəstəliyində perspektivli xəstəlik modifikatorları. Prefarmakologiya. 2019; 10: 351. doi: 10.3389/fphar. 2019.00351
4. Xiao Haiteng, Peng Jie, Wen B və b. Indigo Naturalis, siçanlarda DSS ilə induksiya olunmuş kolitdə yoğun bağırsaq oksidləşdirici stressini və Th1/Th17 reaksiyalarını inhibə edir. Oxid Med Cell Longev.2019;2019:9480945.doi: 10.1155/2019/9480945
5. Chen M, Ding Y, Tong Z. Sophora flavescens (Sophora flavescens) Çin bitki mənşəli dərmanının xoralı kolitin müalicəsində effektivliyi və təhlükəsizliyi: klinik sübutlar və potensial mexanizmlər. Prefarmakologiya.2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Cao Fang, Liu Jie, Sha Benxing, Pan HF. Təbii məhsullar: iltihabi bağırsaq xəstəliyinin müalicəsi üçün eksperimental olaraq təsirli dərmanlar. Curr Pharmaceuticals.2019;25:4893–4913.doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. Zhang C, Jiang M, Lu A. Ənənəvi Çin təbabəti ilə ülseratif kolitin adyuvant müalicəsi haqqında düşüncələr. Clinical Rev Allergy Immunization. 2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Li Zhongteng, Li Li, Chen TT və b. Mövsümi qripin müalicəsində Banlangen qranullarının effektivliyi və təhlükəsizliyi: randomizə edilmiş nəzarətli sınaq üçün tədqiqat protokolu.trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-0645-x